СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ВИЗНАЧЕННЯ СУМИ СТЕРИНІВ

Для спектрофотометрического визначення суми стеринів використовують кілька реакцій:

а) реакція з реактивом Лібермана - Бурхарда. Хлороформний розчин неомиляемой фракціїліпідів змішують з рівним об'ємом реактиву, що складається з оцтового ангідриду з додаванням концентрованої сірчаної кислоти. При цьому розвивається фарбування від зеленого до блакитного, залежно від типу стерину. Концентрацію стеринів визначають спектрофотометричним або колориметричним методом [див .: 28, с. 87].

Недоліком даного методу є те, що в екстракті можуть перебувати заважають компоненти, які дають псевдопозитивну реакцію. Для позбавлення від даних артефактів рекомендується перед проведенням реакції провести поділ компонентів за допомогою ТШХ і елюіровать зону, відповідну стандарту стеринів. Зазвичай каротиноїди переміщаються з фронтом розчинника, нестероїдні компоненти, що реагують з реактивом, залишаються на старті, а стерини знаходяться в середній частині хроматограми;

• б) реакція стеринів з формальдегідом та сірчаною кислотою. В даній реакції розвивається фарбування вишневого кольору. Концентрацію стеринів визначають спектрофотометрично [див .: 25, с. 168];
• в) визначення концентрації стеринів з поглинання в УФ-спектрі [див .: 28, с. 87]. Даний метод дає ненадійні результати, так як є безліч з'єднань, які також поглинають світло в УФ-області і заважають аналізу.

ГАЗО-РІДИННА ХРОМАТОГРАФІЯ СТЕРИНІВ

Метод є найбільш точним і поширеним при аналізі стеринів. Однак стерини мають низьку летючість, тому для ефективної газо-рідинної хроматографії цих ліпідів необхідно провести їх модифікацію шляхом метилування діазометаном або борирования.